产品简介
本产品包含Taq DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,减少了移液操作,提高了通量和结果的重现性。体系中加入的保护剂使得Master Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。本品提供含有电泳缓冲液和染料的版本,可在反应结束后直接进行电泳,使用方便。PCR产物的3’端带A,可克隆至T载体。
使用方法
1. 反应体系配制
ddH2O
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to 50 μl
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2 × Taq Master Mix
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25 μl
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模板DNA
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Optional
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引物1 (10 μM)
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2 μl
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引物2 (10 μM)
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2 μl
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2. PCR反应条件设置
94°C
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5 min (预变性)
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94°C
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30 sec
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30-35 Cycles
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55°C(退火温度需要根据引物退火温度调整)
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30 sec
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72°C
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60 sec/kb
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72°C
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7 min (彻底延伸)
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产品控制
核酸外切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg λ-Hind III在37°C下孵育16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在37°C下孵育4小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
功能检测:50 μl体系中,以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin gene。30个循环后取1/10 PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的360 bp条带。
储存条件
-20°C
仅供研究,不得用于临床诊断
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