产品简介:
MesGenTM PreMix (SYBR Green)是实时定量PCR扩增所需的预混和溶液,是采用SYBR Green I荧光染料法进行Real Time PCR的专用试剂。本SYBR Green Mix由经化学修饰的Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、最佳浓度的SYBR Green 及经优化后的缓冲液等扩增必需组分(模板与引物除外)所组成的2×浓度混合试剂。
产品原理:
SYBR Green法的基本原理是SYBR Green能结合到DNA双螺旋的小沟。处于溶解状态的SYBR Green染料未结合双链DNA时显示低的荧光强度,一旦结合到双链DNA之后荧光信号会明显增强,所以可通过检测反应体系中的SYBR Green 荧光强度,达到检测PCR产物扩增量的目的。PCR反应时生成双链DNA,且随着PCR反应的进行,双链DNA数量指数级增加,SYBR Green与双链DNA结合发出荧光强度也随着DNA数量的增加而增强,通过检测PCR反应液中的荧光信号强度,可以对目的基因进行准确定量,同时SYBR Green法还可以通过溶解曲线分析测定扩增的目的DNA片段的溶解温度从而检测扩增的特异性。
特点与优势:
1. 快速:广泛适用于Real Time PCR反应,使用两步法可快速、准确的对目的基因进行检测或定量;
2. 简捷:在2×浓度的Mix中,预先混有SYBR® Green I,PCR反应液配制时,只需加入模板、引物、灭菌蒸馏水便可进行Real Time PCR反应,操作简单方便。
3. 高特异性:Mix混合液中含有经化学修饰后的DNA 聚合酶,可以使用Hot Start法进行PCR,可有效避免常温操作时所带来的非特异扩增,避免繁琐的冰上操作。同时与开发改良的缓冲液系统相结合,使特异性能得到大大改善,可有效抑制引物二聚体及非特异性扩增的发生。
4. 高灵敏性:能有效检测低拷贝数模板量,在等同模板量使用的前体下,MesGenTM产品经40循环扩增后具有更低的Ct值及更高的信号值。
5. 广泛适用性:本制品在极大模板用量范围内不仅对常规长度80-150bp的DNA片段具高效的扩增效率,对长度达300bp的片段仍表现出较强的扩增优势。此外GC含量高达65%,75%的DNA片段仍能在该体系中实现扩增。
6. 溶解曲线峰形改善:本制品所扩增片段的溶解曲线具有更窄更尖,对称性好的特点。
7. 高重复性:优化的反应体系及严格的质量检测有效控制试剂盒批内及批次差异,保证试验间的高度重复性与可现性。
储存条件:
在使用前推荐-20℃避光保存,在使用后推荐4℃避光保存,避免反复冻融。
|