吖啶橙(Acridine Orange, AO)染色液(1mg/ml) | |||||||||
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产品货号 | 产品名称 | CAS号 | 包装 | 市场价(人民币) | 库存状态 | ||||
MG4589 | 吖啶橙(Acridine Orange, AO)染色液(1mg/ml) |
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产品概述 | |
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产品简介
流式细胞术检测细胞DNA含量,通过染色定量分析DNA,亦可通过荧光显微镜观察形态变化。吖啶橙(Acridine Orange, AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记 DNA、RNA,属于异染性荧光染 料。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。因此 AO常用于细胞内DNA和RNA进行检测。 AO 与核酸结合方式主要有: 1、插入性结合,AO 嵌入核酸双链的碱基对之间, 这种结合方式主要为AO与DNA的结合,其荧光发射峰为 530nm,激发后呈绿色荧光; 2、静电吸 引,带正电荷的 AO 与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为 AO 与 RNA 的结合,其荧光发射峰为 640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧 光。因此,吖啶橙嵌合到双链 DNA 分子中显绿色,与DNA单链或RNA结合时发桔黄色或橙红色 荧光。 吖啶橙染色液(1mg/ml)为储存液,使用时应稀释到合适浓度后使用。染色后在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片 颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙染色常与 EB 染色合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
操作步骤(仅供参考):
1、 收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用 PBS 清洗细胞 1 次,计数并调节细胞浓度至10*6/ml。
2、 取适量的细胞悬液,加入 Acridine Orange Stain(1mg/ml),使 AO 终浓度为 8.5~17µg/ml,轻轻混匀。
3、 室温避光染色 15~20min,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。
4、 荧光显微镜下观察(激发滤光片波长 488nm,阻断滤光片波长 515nm),计数并拍照。
保存方式 2-8℃,避光,有效期6个月 仅供科学研究 禁止用于临床诊断 |
产品手册 | MSDS | COA | 参考 |
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pdfword | IEEE Transactions on Instrumentation and Measurement ( Volume: 72) 2023 |